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GenomeCraft ドナーDNA
ssODN(一本鎖オリゴドナーDNA)合成
塩基置換やloxPサイト等、数十塩基までの配列をノックインするドナーDNAとしてご利用いただけます。導入したいノックイン配列の両端にCRISPR/Casターゲット領域と相同な各40～80塩基程度を付加することで、相同組換のドナーDNAとして機能します。精製度の高いPAGE精製の利用をお奨めしております。
御依頼方法：
150塩基以下はオリゴDNA合成として【受託サービスログインサイト】
よりご依頼いただけます。
151塩基から200塩基までの配列は合成可否を確認いたしますので下記までお問合せください。
その際、ヌクレアーゼ耐性修飾(Phosphorothioate)のご希望も合わせてお知らせください。
株式会社ファスマック ゲノム編集サービス担当
ssDNA(一本鎖DNA)作製
オリゴDNA合成では対応できない長鎖の一本鎖DNAを作製いたします。変異がないことを確認したクローンDNAを鋳型にしたHigh fidelity amplification産物を使用しますので高精度の一本鎖DNAをお届けいたします。
ゲノム編集のノックイン実験では、一本鎖DNAはプラスミドのターゲティングベクターよりも相同組換アームの長さを短く(数十～300塩基程度)することができること、比較的簡単に効率良くノックインが起こることが報告されています。GFP等の遺伝子導入やfloxアリルの作製にお使いください。
価格と納期(注1、注2)：下表の通り
| 長さ | 保証収量(1 OD=37 μg換算) | 価格(税別) | 納期 |
|---|---|---|---|
| 200～500 nt | 0.05 OD(約1.9 μg) | ¥50,000 | 20営業日 |
| 501～1000 nt | 0.1 OD (約3.7 μg) | ¥100,000 | |
| 1001～1500 nt | ¥150,000 | 25営業日 | |
| 1501～2000 nt | ¥200,000 | ||
| 2001～2500 nt | ¥250,000 | 30営業日 | |
| 2501～3000 nt | ¥300,000 | ||
| 3001～3500 nt | ¥350,000 | 35営業日 | |
| 3501～4000 nt | ¥400,000 |
御依頼方法：ご希望の配列を下記アドレスまでメールでお送りください。
株式会社ファスマック ゲノム編集サービス担当
【参考文献】
注1：5’末端にヌクレアーゼ耐性修飾(Phosphorothioate)が付加されます。
注2：配列によっては価格や納期が変更になることが有ります。
注3：受注後であっても予期せず合成が困難な場合には弊社都合で注文をキャンセルさせていただくことが有ります。その際には製品代金はいただきません。
ターゲティングベクター作製
遺伝子ノックアウトやノックイン等、遺伝子ターゲティング用のドナーDNAを作製いたします。
レポーター遺伝子導入による可視化や遺伝子カセットの導入によるコンディショナル発現制御等が可能になり、実験の幅が大きく広がります。CRISPR/Casターゲット領域と相同な0.5 kb～2 kb程度配列を相同組換アームとして付加することで数kb程度のノックインも可能です。また生物種によってはより短いアーム配列でのノックイン手法も報告されています。ご希望のデザインでベクター構築をいたします。
【参考文献】
ゲノムDNAやBACクローン等をテンプレートにしたPCRクローニングや、人工DNA合成を組み合わせてベクター構築を行いますので、通常の人工遺伝子作製では対応が難しい繰り返しを含む配列にも対応可能です。また長鎖の配列でも比較的早い納品が可能です。
(必要に応じてテンプレートDNAの提供をお願いいたします)
【価格例】
アーム各1.5 kb + 導入配列0.5 kb 計3.5 kb 20万円
アーム各1.8 kb + 導入配列1.8 kb 計5.4 kb 27万円
価格や納期は配列によって変わります。メールまたはお電話でご相談ください。
株式会社ファスマック
TEL 046-281-9901 (ご注文に関すること)
TEL 046-280-5967 (技術的なお問合せ)