GenomeCraft Cas9

N末端とC末端の両方に核移行シグナルが付いたStreptococcus pyogenes由来のCas9タンパク質です。マイクロインジェクション、エレクトロポレーション、リポフェクション等で細胞へ導入してのゲノム編集やin vitroでのDNA切断実験等にお使いいただけます。

Recombinant Protein

Cas9タンパク質

CRISPR/Casによるゲノム編集で最も良く使用されている2本鎖切断型です。
製品コード 容量(5µg/µl) 価格(税別)
GE-005-S 100μg 22,000円
GE-005-L 100μg x3 55,000円

Cas9 D10Aニッケース

ターゲット配列のアンチセンス鎖(PAM nGGの相補鎖)のみを切断する1本鎖切断型です。
製品コード 容量(5µg/µl) 価格(税別)
GE-006-S 100μg 22,000円
GE-006-L 100μg x3 55,000円
 
保存温度   :-20℃以下(長期保管は-80℃推奨)
保存バッファー:10mM Tris-HCl, 200mM KCl, 1mM DTT, 20%Glycerol(PH7.5)
タンパク質由来:Recombinant E. coli
付属バッファー
Dilution buffer① :10mM Tris-HCl, 200mM KCl, 1mM DTT, 20%Glycerol(PH7.5)
Dilution buffer② :10mM Tris-HCl, 200mM KCl, 1mM DTT, 80%Glycerol(PH7.5)
10x in vitro buffer:1,000 mM NaCl, 500 mM Tris-HCl(PH 7.9), 100 mM MgCl2, 10 mM DTT

【ご注文方法】

御依頼方法:ご希望の製品、数量を下記アドレスまでご連絡ください。
株式会社ファスマック ゲノム編集サービス担当
 

使用例

マウス

GENOME CRAFT Cas9 protein とeGFPに対するsgRNAを混合してeGFPを発現するマウス1細胞期胚にインジェクション*し、発生4日目にその発現を観察した。またeGFP遺伝子配列の解析を行った。
*Cas9protein : 50ng/ul、sgRNA: 5ng/ul
観察した10個の受精卵のうち9個で蛍光の消失が確認された。また、eGFPの蛍光が消失した細胞のターゲット領域のシークエンス解析で変異導入が確認された。
データ提供  東海大学医学部医学科基礎医学系分子生命科学 大塚正人 様

ゼブラフィッシュ

2つの遺伝子(spns2:心臓形成に関与、tyr:色素形成に関与)に対するGENOME CRAFT Cas9 protein 、Type CT(crRNA+tracrRNA)を 混合してゼブラフィッシュ胚(1-2細胞期)にインジェクションし、発生の様子を観察した。
 No-injection
 GenomeCraft *
*Cas9protein : 400pg、tracerRNA: 100pg
crRNA spns2 : 25pg、crRNA tyr: 25pg
受精1日後(上段)にGFPで染色された心臓の形成異常(白矢印)が、2日後(下段)には目の色素形成異常(黒矢印)が観察された。これらはそれぞれspns2欠損、tyr欠損の表現型と同一である。
データ提供  山梨大学大学院 総合研究部 発生生物学 川原敦雄 様